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實(shí)驗(yàn)室消毒自凈服務(wù)技術(shù)支持
一、細(xì)胞培養(yǎng)室的消毒注意: 1、甲醛薰蒸: 用量30 ml/m3,室內(nèi)溫度21~24℃,相對濕度75%~85%,加熱薰蒸使蒸汽彌漫全室,關(guān)閉門窗1 h。 甲醛水溶液為無色,具有強(qiáng)烈刺激性氣味的液體,可殺滅多數(shù)微生物,價(jià)廉,熏蒸消毒時(shí)不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。其主要用法為: (1).熏蒸消毒: 對室內(nèi)消毒其用量為20-25%毫升/米,在加熱該溶液時(shí)同時(shí)煮沸一壺水,使室內(nèi)相對溫度保持在70-90%左右,室內(nèi)溫度在20攝氏度以上,作用時(shí)間12-24小時(shí)。如消毒皮毛服裝,甲醛水溶液的用量可加至125毫升/米,掛衣密度為每平方米3套為宜。熏蒸消毒時(shí)應(yīng)密閉門窗。消毒后一般多用自然通風(fēng)驅(qū)散甲醛氣體,其需時(shí)較長,急于排出氣體,可將25%氨水加熱蒸發(fā)中和。氨水用量為所用甲醛水溶液的一半,中和時(shí)間為30分鐘。 (2).自然揮發(fā): 將較大量的甲醛水溶液放入一敞開容器中,室內(nèi)溫度保持在18攝氏度以上,同時(shí)室內(nèi)噴水以保持相對濕度在70%以上,經(jīng)16小時(shí)可達(dá)到室內(nèi)消毒的目的。 關(guān)于甲酸、甲醛和甲醇三者的毒性比較:甲酸的毒性比甲醇大6倍,甲醛的毒性比甲醇大30倍。所以吃進(jìn)4~10克甲醇,就能引起慢性中毒。它的毒性作用主要表現(xiàn)在損傷視力,使視力減退(不能矯正),視野縮小,以致雙目失明,直到死亡。
2、紫外線: 紫外線的穿透能力非常弱的,主要靠電離產(chǎn)生氧自由基來消毒。細(xì)胞培養(yǎng)室里面一些不能照射紫外的物件可以用一般的材料蓋住。如:玻璃和有機(jī)玻璃都可以的。紫外有些人認(rèn)為大型精密的顯微鏡是不可以照紫外的,因?yàn)樗鼈兊溺R頭上涂的膜會被分解掉,但我特意問了光學(xué)系的老師,他們認(rèn)為是沒有關(guān)系的。 此外,不要擔(dān)心紫外不能照射到的角落,因?yàn)樽贤庾詢艄δ艹俗贤獗旧硪酝?,還可以由產(chǎn)生的臭氧來完成。 臭氧過量吸入的作用應(yīng)該和雙氧水的作用是一樣的,個(gè)人認(rèn)為也許有一定的致癌性。所以紫外自凈以后,過一個(gè)小時(shí)再進(jìn)去。(zui少也要30分鐘)
3、新潔爾滅: 【藥品名稱】 (新潔而滅溶液) 無色或淡黃色的澄明液體;芳香;味極苦;強(qiáng)力振搖能發(fā)生多量泡沫,遇低溫可能發(fā)生渾濁或沉淀。皮膚科用藥品?!九R床應(yīng)用】用于皮膚黏膜和傷口的消毒?!居梅ㄓ昧俊?外用,使用前應(yīng)稀釋即配即用。皮膚消毒使用0.1%溶液;創(chuàng)面黏膜消毒用0.01%溶液; 稀釋方法:0.1%溶液:取本品一份,加純化水或清水50份;0.01%溶液:取本品1份,加純化水或清水500份?!咀⒁馐马?xiàng)】 l. 本品為外用消毒防腐藥,不可內(nèi)服。2. 不得用塑料或鋁制容器貯存。3. 涂布部位如有灼燒感、瘙癢、紅腫等,應(yīng)停止用藥,洗凈。必要時(shí)向醫(yī)師咨詢。4. 低溫時(shí),可能出現(xiàn)混濁或沉淀,可置于溫水中加溫,振搖使溶解后使用。5. 兒童必須在成人監(jiān)護(hù)下使用?!静涣挤磻?yīng)】偶見過敏反應(yīng)。 【藥物相互作用】 l. 不得與肥皂或其他合成洗滌劑并用。2. 局部消毒時(shí)勿雙氧水、磺胺粉等并用。 3. 如正在使用其他藥品,使用本品前請咨詢醫(yī)師或藥師?!疽?guī) 格】500毫升﹕25克;100毫升﹕5克(5%)。【貯 藏】避光,密封保存。 評論:在甲醛自凈前,先用新潔爾來擦洗整個(gè)墻面,此外,平時(shí)地板自凈也可以用它。新潔爾滅和酒精相比,zui大的優(yōu)點(diǎn)是便宜,因?yàn)樾聺崰枩?00ml只需5元,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價(jià)格可能是新潔爾滅的幾十倍。
二、培養(yǎng)準(zhǔn)備時(shí)的培養(yǎng)基的選擇和操作過程注意以下細(xì)節(jié):
1、多聚賴氨酸: 多聚賴氨酸溶液(Poly-L-Lysine Solution) Conc.: 0.1% w/v, in water Storage: 18-26℃ Thimerosal, 0.01%, added as preservative 多聚賴氨酸溶液是廣泛應(yīng)用的組織切片與玻片黏合劑,該多聚陽離子分子與組織切片上的陰離子相互作用會產(chǎn)生較強(qiáng)的黏合力。 適用組織學(xué),免疫組織學(xué),切片,細(xì)胞涂片,原位雜交等使用的玻片的防脫片處理,以防實(shí)驗(yàn)操作過程中組織掉片。也可用于細(xì)胞培養(yǎng),增加細(xì)胞貼壁能力。
免疫學(xué) 操作步驟(可直接在玻片上涂布) 1. 自凈的ddH2O 1:10稀釋該多聚賴氨酸溶液。 2. 用之前將稀釋的多聚賴氨酸溶液放在室內(nèi),使其溫度到室溫18-26℃ 3. 將玻片浸在稀釋的多聚賴氨酸溶液5分鐘。注意增加時(shí)間不會提高包被效果。 4.在60℃烘箱1小時(shí)干燥,或室溫18-26℃過夜干燥待用。 [注意] 1. 每100mL已稀釋的多聚賴氨酸溶液要包被的玻片40-90張, 超過90張片子將影響其黏合力。 2. 用之前的玻片必須保持清潔。必要時(shí)用含1% HCl的70%乙醇溶液來清洗。 3. 不要在用過的稀釋液中加新的溶液。 4. 釋過的多聚賴氨酸溶液要放在2-8℃,至少在3個(gè)月內(nèi)是穩(wěn)定的。 5. 用過的稀釋液要過濾,若出現(xiàn)渾濁或長菌要丟棄。
2、洗液的一些問題:
重鉻酸鉀硫酸洗液 通常稱為洗潔液或洗液,其成分主要為重鉻酸鉀與硫酸,是強(qiáng)氧化劑。 K2Cr2O7 4H2SO4 K2SO4 Cr2(SO4)3 3[O] 因其有很強(qiáng)的氧化力,一般有機(jī)物如血、尿、油脂等類污遺跡可被氧化而除凈。事先將溶液稍微加熱,則效力更強(qiáng)。新鮮鉻酸洗液為棕紅色,若使用的次數(shù)過多,重鉻酸鉀就被還原為綠色的鉻酸鹽,效力減小,此時(shí)可加熱濃縮或補(bǔ)加重鉻酸鉀,仍可繼續(xù)使用。 配方:稀洗液 重鉻酸鉀 10g 粗濃硫酸 200ml 水 100ml 濃洗液 重鉻酸鉀 20g 粗濃硫酸 350ml 水 40ml 配法:先取粗制重鉻酸鉀20g,放于大燒杯內(nèi),加普通水100ml使重鉻酸鉀溶解(必要時(shí)可加熱溶解)。再將粗制濃硫酸(200ml)緩緩沿邊緣加入上述重鉻酸鉀溶液中即成。加濃硫酸時(shí)須用玻璃棒不斷攪拌,并注意防止液體外溢。若用瓷桶大量配制,注意瓷桶內(nèi)面必須沒有掉瓷,以免強(qiáng)酸燒壞瓷桶。配時(shí)切記,不能把水加于硫酸內(nèi)(將因硫酸遇水瞬間產(chǎn)生大量的熱量使水沸騰,體積膨脹而發(fā)生爆濺)。 使用時(shí)先將玻皿用肥皂水洗刷1~2次,再用清水沖凈倒干,然后放入洗液中浸泡約2小時(shí),有時(shí)還需加熱,提高清潔效率。經(jīng)洗液浸泡的玻皿,可先用自來水沖洗多次,然后再用蒸餾水沖洗1~2次即可。 附有蛋白質(zhì)類或血液較多的玻皿,切勿用洗液,因易使其凝固,更不可對有如酒精的容器用洗液洗滌。 洗液對皮膚、衣物等均有腐蝕作用,故應(yīng)妥善保存。使用時(shí)帶保護(hù)手套。為防止吸收空氣中的水分而變質(zhì),洗液貯存時(shí)應(yīng)加蓋。 注意: 洗液具有強(qiáng)烈的腐蝕性,接觸皮膚后會,皮膚會變黃,2天后會脫一層皮
操作:在神經(jīng)元培養(yǎng)時(shí)可以用來抑制膠質(zhì)的生長。 |
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